O Ensaio Imunoenzimático ELISA é uma técnica analítica sensível com base na reação antígeno-anticorpo, amplamente utilizada na pesquisa e no diagnóstico clínico. Sobre os princípios e as metodologias das diferentes variações do ELISA, analise as assertivas a seguir:

I. O método ELISA indireto é empregado majoritariamente para a detecção e a quantificação de antígenos em uma amostra biológica.

II. As etapas de lavagem, geralmente utilizando soluções tampão com detergentes, têm como objetivo principal remover moléculas não ligadas, evitando reações inespecíficas.

III. No ELISA indireto, o anticorpo secundário, o qual está conjugado à uma enzima, liga-se diretamente ao antígeno imobilizado na placa para, após a adição do substrato, promover a alteração de coloração.

IV. Após a reação da enzima conjugada com o seu substrato cromogênico, o produto da reação formado é quantificado por meio da leitura de absorbância.

V. No ELISA direto, o poço da microplaca é previamente sensibilizado com um anticorpo de captura fixado à sua superfície.

Quais estão corretas?

Bovino, HPB, fêmea, de 2 anos de idade, apresentou lesões vesiculares e pustulares na mucosa vulvar. Após dez dias, houve regressão clínica completa. Quatro meses depois, coincidindo com o estresse do terço final da gestação e a proximidade do parto, as lesões recidivaram no mesmo local, regredindo novamente após o estresse do parto. Exames laboratoriais de isolamento viral e PCR de swab vaginal detectaram a presença da mesma cepa viral durante os episódios de lesão ativa, permanecendo negativos nos períodos de ausência de lesão macroscópica. Com base na dinâmica biológica entre o agente e o hospedeiro, o padrão de infecção viral em questão é classificado como infecção

O Teste de Susceptibilidade aos Antimicrobianos (TSA) por disco-difusão (Teste de Kirby-Bauer) é uma ferramenta essencial na rotina laboratorial. Para que os resultados sejam reprodutíveis e comparáveis aos padrões internacionais, como os do CLSI ou EUCAST, diversas variáveis devem ser rigidamente controladas. Em relação ao TSA por disco-difusão, analise as assertivas a seguir e assinale V, se verdadeiras, ou F, se falsas.

( ) O inóculo bacteriano deve ser padronizado utilizando-se a escala 0,5 de McFarland, o que equivale a aproximadamente 1,5x10⁸ UFC/mL. Um inóculo muito denso (acima de 0,5) pode resultar em halos falsamente reduzidos, levando a uma interpretação errônea de resistência.

( ) Os resultados de sensibilidade in vitro garantem o sucesso terapêutico in vivo, uma vez que as condições de difusão do fármaco no ágar mimetizam perfeitamente a farmacocinética e a farmacodinâmica do antimicrobiano nos diferentes tecidos do paciente animal.

( ) A semeadura do inóculo no ágar Mueller-Hinton deve ser realizada pela técnica de esgotamento por estrias com alça de platina, garantindo que as colônias cresçam isoladamente para facilitar a medição dos halos de inibição ao redor dos discos.

( ) Para a realização do teste, utilizam-se discos de papel filtro impregnados com concentrações específicas de antimicrobianos. Após a aplicação, o fármaco difunde-se radialmente pelo meio. Após a incubação, mede-se o diâmetro total do halo (incluindo o disco), comparando o valor em milímetros com tabelas de pontos de corte específicas para a espécie bacteriana.

( ) O ágar Mueller-Hinton é o meio padrão por possuir alta concentração de timina e timidina, além de cátions divalentes em excesso, o que favorece o crescimento de bactérias fastidiosas e aumenta a atividade de sulfonamidas e tetraciclinas.

A ordem correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:

A diversidade genética dos vírus é um fator crucial para sua adaptação, patogenicidade e evasão da resposta imune do hospedeiro. Dentre os diversos mecanismos que contribuem para essa variabilidade, destacam-se o ressortimento, a recombinação viral, a complementação, a poliploidia e a mistura fenotípica. Sobre o tema, analise as assertivas abaixo e assinale V, se verdadeiras, ou F, se falsas.

( ) O ressortimento é um processo genético que ocorre exclusivamente em vírus com genoma segmentado, como o vírus influenza, e envolve a troca de segmentos inteiros de material genético entre diferentes cepas virais que coinfectam a mesma célula.

( ) A recombinação viral em vírus de DNA geralmente ocorre por quebra e religação de fitas de ácido nucleico, enquanto, em vírus de RNA, um mecanismo comum é o de copy-choice, no qual a polimerase viral troca de molde durante a replicação, resultando em um genoma híbrido estável.

( ) A complementação é uma interação genética na qual um vírus defectivo adquire a capacidade de replicação completa ao ter seu genoma alterado por um vírus auxiliar que fornece os genes ausentes, resultando em uma progênie de vírus defectivos com genoma modificado.

( ) A mistura fenotípica é um fenômeno que resulta em alterações permanentes no genoma viral, conferindo à progênie características herdáveis de tropismo e antigenicidade de ambos os vírus parentais que coinfectaram a célula.

( ) A poliploidia viral refere-se à presença de mais de uma cópia completa do genoma viral dentro de uma única partícula viral, sendo um evento comum em retrovírus, que são naturalmente diploides, ou em paramixovírus, que podem empacotar múltiplos nucleocapsídeos.

A ordem correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:

Em relação à estrutura e à composição viral, analise as assertivas a seguir e assinale V, se verdadeiras, ou F, se falsas.

( ) Vírus são estruturas metaestáveis, as quais são resistentes no meio extracelular e capazes de se desintegrar para liberar o genoma ao penetrarem no meio intracelular.

( ) Os genomas virais são invariavelmente haploides, podendo ser constituídos de RNA ou DNA.

( ) Em um vírus de genoma RNA com polaridade negativa, a carga elétrica do RNA permite que ele se ligue mais facilmente com moléculas positivas que o auxiliam na replicação viral.

( ) O capsídeo viral é uma camada proteica que recobre externamente o genoma; em vírus não envelopados, as proteínas do capsídeo são frequentemente alvo da ação de anticorpos neutralizantes.

( ) A simetria helicoidal, encontrada em vírus como o da raiva, é resultado da ligação de múltiplas cópias de uma mesma proteína, resultando em uma estrutura espiralada alongada, que pode ser flexível ou relativamente rígida.

A ordem correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:

Um laboratorista inoculou 100 unidades formadoras de colônias de uma cepa bacteriana em um frasco contendo 50 ml de caldo BHI. Após a inoculação, esse frasco foi fechado com uma bucha estéril, de modo a impedir a contaminação bacteriana externa, e levado em estufa de incubação, sob agitação constante à 37 °C. Durante o período de realização do experimento, não foi adicionado qualquer meio de crescimento bacteriano e não houve contaminação microbiológica de fontes externas. Sob essas condições controladas, a cepa demonstrou um tempo de geração de 30 minutos. Observou-se que a cinética de crescimento seguiu as fases clássicas, com uma fase lag, uma fase logarítmica, uma fase estacionária e uma fase de declínio, as quais tiveram duração de 1, 6, 2 e 6 horas, respectivamente. Considerando esse cenário experimental, assinale a alternativa que apresenta, correta e respectivamente, a concentração bacteriana, expressa em Unidades Formadoras de Colônias por mililitro (UFC/mL), nos seguintes pontos temporais após a inoculação inicial: 1h; 2h; 4h; 7h e 9h.

A respeito da etologia enquanto campo científico, analise as assertivas a seguir:

I. É o campo de estudo que busca compreender o comportamento animal em ambientes naturais e seu valor adaptativo ao longo da evolução.

II. A etologia e o behaviorismo compartilham integralmente os mesmos pressupostos teóricos, diferindo apenas quanto às espécies estudadas.

III. A etologia leva em consideração tanto aspectos inatos quanto aprendidos na explicação do comportamento animal.

IV. Tem como foco principal de estudo os animais domésticos, especialmente aqueles submetidos a treinamento funcional.

V. A análise etológica pode contribuir para práticas aplicadas, como o manejo e o treinamento animal, embora seu foco principal seja científico.

Quais estão corretas?