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No uso da técnica de citometria de fluxo e seleção de fluorocromos, considera-se a ocorrência da excitação dos fluorocromos por uma radiação laser ao emitir um comprimento de onda (cor), que é detectado por um sensor, chamado de fotomultiplicadores. Sobre este processo, pode se dizer que:
 

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Os fluorocromos empregados na citometria de fluxo são classificados em vários grupos, incluindo fluorocromos usados para rotular proteínas covalentemente, e fluorocromos para ácidos nucleicos. Sobre o uso de fluorocromos, pode se dizer que:
 

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Células são geralmente coradas com sondas fluorescentes chamadas fluorocromos. Os fluorocromos são capazes de captar a presença de componentes que de outra forma não seriam visíveis. Sobre os princípios técnicos aplicados ao uso de fluorocromos pode se dizer que:
 

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Os princípios metodológicos da citometria de fluxo consideram duas principais análises conhecidas, a primeira denominada non-sorting flow cytometry, que determina atributos celulares sem separação física com a dispersão e a emissão de fluorescência, e a segunda denominada sorting flow cytometry, que permite a análise e a purificação de células e partículas, como, por exemplo, o fluorescent activated cell sorters (FACs).

Os FACs permitem a purificação de células marcadas com fluorescência dentre uma concentração de células mistas. Sobre o seu funcionamento considere que:

I. no componente fluídico de um citômetro permite a coleta e transporte amostral, enquanto que o componente óptico proporciona a excitação da partícula/célula, que é conectada a uma rede eletrônica de detectoresligada a um computador.

II. a rede eletrônica detecta o sinal emitido e converte em dados digitais não proporcionais à intensidade da luz que estão conectadas ao software computacional que executa a análise de dados.

III. o processo é baseado na radiação laser direcionada, que excita substâncias fluorescentes presentes nas células, que podem ser compreendidas por interpolação das informações biológicas, moleculares e/ou químicas das células em suspensão.

IV. a citometria de fluxo pode ser empregada em diversas aplicações, seja na detecção de células inteiras, e componentes celulares tais como organelas, núcleos ou moléculas de DNA, RNA.


Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:
 

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Uma das metodologias mais utilizadas para detecção específica de proteínas é o immunoblotting ou western blotting. Sobre essa metodologia, é INCORRETO afirmar que:
 

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Na pandemia de COVID-19, testes de diagnósticos utilizando a técnica de qPCR foram realizados. Sobre essa metodologia de detecção molecular, é correto afirmar que:
 

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Para a vigilância de epizootias em primatas não humanos aplicada à vigilância da febre amarela, amostras de sangue total, soro sanguíneo e tecidos são encaminhadas para investigação. São exemplos de técnicas laboratoriais utilizadas no diagnóstico e/ou pesquisa do “genoma viral completo” e “vírion”, respectivamente:
 

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Sobre a relação entre valores de Ct e carga viral em um ensaio de PCR em tempo real, considere as afirmativas a seguir:

I. Quanto maior é o valor do Ct, menor é carga viral. II. Quanto maior é o valor do Ct, maior é a carga viral III. Quanto menor é o valor do Ct, maior é a carga viral.


Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:
 

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Em um ensaio de avaliação de infectividade viral em cultura celular, o sobrenadante da mesma poderá ser submetido às técnicas de extração de ácido nucleico viral e amplificação de DNA ou cDNA para detecção do genoma viral. Para a titulação viral por PCR, utiliza-se:
 

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Durante a padronização de um ensaio de PCR em tempo real multiplex para três alvos distintos, a combinação de fluoróforos mais adequada para marcação das diferentes sondas é:
 

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