Sobre o preparo de amostras a serem observadas em microscópio eletrônicos de transmissão, analise as afirmativas a seguir.

I. O glutaraldeído é utilizado como fixador primário devido a sua habilidade de estabelecer ligações entre proteínas através dos seus grupos aldeídos, o que torna esta molécula bi-funcional. Especificamente, os grupamentos aldeídos do glutaraldeído reagem com lisinas em proteínas adjacentes, além de interagirem com lipídeos, carboidratos e ácidos nucléicos.

II. O tetróxido de ósmio é um fixador secundário e se liga especificamente à proteínas promovendo a sua agregação. Protocolos de visualização dos microtúbulos celulares incluem a fixação por tetróxido de ósmio a 4°C. Além disto, este metal pesado acrescenta densidade e contraste ao tecido biológico.

III. Um protocolo geral para preparação de amostras envolve a fixação primária com glutaraldeido; lavagem em tampão; fixação secundária com tetróxido de ósmio; desidratação com séries de alcoóis (30%, 50%, 70%, 95% e absoluto); transição para solvente óxido de propileno; infiltração da resina com um aumento progressivo das concentrações de óxido de propileno e diminuição das concentrações da resina e finalmente secagem.

Assinale:

Sobre a preparação de amostras biológicas a serem observadas em microscópio eletrônico de varredura, assinale a alternativa correta.

Sobre o processamento de imagens geradas por microscópios eletrônicos, analise as afirmativas a seguir.

I. Os parâmetros gama de uma imagem referem-se às correções matemáticas não lineares que são aplicadas a imagens digitais. Desta forma, o parâmetro gama é principalmente utilizado para aumentar o contraste em áreas escuras na imagem. É sugerido que o gama seja ajustado inicialmente, antes mesmo do ajuste de outros parâmetros como brilho e contraste.

II. Muitos programas de computador capazes de analisar e processar imagens geradas por microscópios eletrônicos são capazes de analisar quantitativamente estruturas ou partículas com a criação de um código binário (binary image) que converte a imagem em tons de branco e preto. Pelo processo da utilização de ferramentas de erosão (erosion), as partículas superpostas podem ser separadas com a remoção dos pixels contidos no perímetro dos objetos e finalmente contados.

III. Em geral, os programas utilizados para análise de imagens geradas por microscópios eletrônicos são capazes de avaliar parâmetros como: contagem de partículas, área das estruturas, diâmetro das estruturas ou partículas, comprimento, centro de uma massa (centroid) e determinação de ângulos.

Assinale:

Sobre os processos de ultramicrotomia, analise as afirmativas a seguir.

I. No processo de ultramicrotomia, o espécime é cortado em fatias finas para serem observadas em microscópios eletrônicos. Neste processo, as fatias são geradas com uma espessura mínima de 300 nm, de forma que os elétrons gerados pelo microscópio eletrônico de varredura sejam capazes de atravessar a amostra para a geração das imagens.

II. No processo de crioultramicrotomia, as amostras são congeladas em nitrogênio líquido e fatiadas utilizando lâminas também resfriadas. O processo de congelamento deve ser rápido de forma que a água contida dentro das células seja vitrificada em um sólido amorfo prevenindo a formação de cristais que podem danificar as células. No entanto, ao contrário da ultramicrotomia, as amostras não devem ser previamente fixadas com aldeídos, além de não ser indicado para a localização de estruturas ou antígenos por protocolos de imunocitoquímica ou análises por raios X.

III. Ultramicrótomos possuem uma série de lâminas de vidro ou diamante que, por meio de um braço mecânico, fatiam as amostras imobilizadas em blocos de resina ou de parafina. Vibrações devem ser evitadas utilizando mesas anti-vibrações e todo o processo deve ser feito com lâminas embebidas em fluido, sendo a água destilada o fluido mais utilizado.

Assinale:

Uma solução hipertônica contém:

O ciclo celular das células eucarióticas é dividido nas fases G1, S, G2 e M. Sobre a caracterização destas fases, assinale a alternativa correta.

Observe os esquemas 1 e 2 relativos a diferentes tipos de microscópios e assinale a alternativa correta.

Nas células eucarióticas, as proteínas que são destinadas à exportação são sintetizadas no:

Analise as afirmativas a seguir.

I. A tendência de um aminoácido livre que possua uma cadeia lateral como –COOH liberar um próton (pK) é a mesma se este aminoácido estiver em solução ou fizer parte de uma cadeia polipeptídica em uma proteína.

II. Modificações pós traducionais tais como fosforilação, acetilação, ubiquitinação e sumolução podem regular a atividade e a degradação das proteínas.

III. Em um organismo, cujo genoma já tenha sido sequenciado e disponível para consulta, podemos identificar um gene mutante responsável por um fenótipo específico através de mutações induzidas por agentes mutagênicos ou por mutações inseridas através de mutagênese.

Assinale:

Sobre microscopia eletrônica de transmissão, assinale a alternativa incorreta.