A coloração de Gram é uma técnica fundamental e um dos primeiros passos na identificação de bactérias em amostras clínicas, permitindo a diferenciação dos microrganismos em dois grandes grupos (Gram-positivos e Gram-negativos) com base nas características de sua parede celular. Um técnico em patologia clínica está realizando a coloração de Gram em um esfregaço preparado a partir de uma amostra de líquido cefalorraquidiano (LCR) de um paciente com suspeita de meningite. A execução correta de cada etapa da técnica é vital para um resultado fidedigno. Acerca dos reagentes e dos princípios da coloração de Gram, registre V, para as afirmativas verdadeiras, e F, para as falsas:

(__) O cristal violeta, primeiro corante utilizado, penetra e cora todas as células bacterianas de roxo, independentemente da estrutura de sua parede celular.

(__) O lugol (solução de iodo) atua como um agente descorante, removendo seletivamente o cristal violeta das bactérias Gram-negativas, enquanto as Gram-positivas permanecem coradas.

(__) A etapa de descoloração, geralmente realizada com uma mistura de álcool-acetona, é a etapa mais crítica do processo; ela remove o complexo cristal violeta-iodo da fina camada de peptidoglicano das bactérias Gram-negativas, mas não consegue atravessar a espessa camada de peptidoglicano das Gram-positivas.

(__) A fucsina (ou safranina), utilizada como corante de fundo ou contra-corante, cora de vermelho ou rosa as bactérias Gram-negativas que foram previamente descoradas, permitindo sua visualização ao microscópio, enquanto não altera a cor roxa das bactérias Gram-positivas.

Após análise, assinale a alternativa que apresenta a sequência correta dos itens acima, de cima para baixo:

Um Técnico em Patologia Clínica recebe um pedido médico para a coleta de sangue para dosagem de glicose, hemograma completo e tempo de protrombina (TP). Para realizar a coleta de forma eficiente, ele precisa selecionar os tubos corretos e obedecer a uma ordem de coleta específica para evitar a contaminação cruzada de aditivos entre os tubos, o que poderia interferir nos resultados dos exames. Acerca da ordem recomendada para a coleta de múltiplos tubos de sangue por sistema a vácuo, registre V, para as afirmativas verdadeiras, e F, para as falsas:

(__) O primeiro tubo a ser coletado deve ser sempre o de tampa roxa (EDTA) para o hemograma, para garantir a obtenção de uma amostra de qualidade antes que a estase venosa prolongada possa alterar a contagem celular.

(__) A ordem correta de coleta preconiza que o tubo para exames de coagulação (tampa azul, com citrato de sódio) seja coletado antes dos tubos com outros aditivos, como o EDTA, para evitar que o EDTA contamine a amostra de coagulação e quele o cálcio que será adicionado no ensaio, resultando em um TP falsamente prolongado.

(__) O tubo de tampa cinza, contendo fluoreto de sódio e um anticoagulante, deve ser o último a ser coletado, pois o fluoreto pode inibir enzimas, interferindo em diversas dosagens bioquímicas se houver contaminação de outros tubos.

(__) Os tubos para obtenção de soro, com ou sem ativador de coágulo (tampa vermelha ou amarela), devem ser coletados após os tubos para hemocultura, mas antes dos tubos com anticoagulantes, para evitar a contaminação da amostra de soro com anticoagulantes como o citrato ou o EDTA.

Após análise, assinale a alternativa que apresenta a sequência correta dos itens acima, de cima para baixo:

A hemólise, caracterizada pela lise das hemácias e liberação de seu conteúdo intracelular (como hemoglobina e potássio) no plasma ou soro, é uma das interferências pré-analíticas mais comuns e problemáticas em um laboratório de bioquímica. A presença de hemólise pode invalidar a dosagem de diversos analitos. Acerca das causas da hemólise in vitro e dos analitos mais afetados, registre V, para as afirmativas verdadeiras, e F, para as falsas:

(__) A coleta de sangue utilizando uma agulha de calibre muito fino (ex: 25G) para uma veia calibrosa, associada a uma aspiração vigorosa no êmbolo da seringa, pode causar estresse mecânico e ruptura das hemácias.

(__) A dosagem de potássio é um dos exames mais criticamente afetados pela hemólise, pois a concentração de potássio no interior das hemácias é cerca de 25 vezes maior que no plasma, levando a resultados falsamente elevados (pseudo-hipercalemia) em amostras hemolisadas.

(__) A hemólise não interfere nas dosagens enzimáticas, como a de Lactato Desidrogenase (LDH) e Aspartato Aminotransferase (AST/TGO), pois essas enzimas são exclusivas do tecido hepático e não estão presentes nas hemácias.

(__) A centrifugação da amostra de sangue antes da completa retração do coágulo em um tubo de soro (tampa vermelha ou amarela) é uma causa comum de hemólise mecânica.

Após análise, assinale a alternativa que apresenta a sequência correta dos itens acima, de cima para baixo:

Os meios de cultura são preparações nutritivas essenciais para o cultivo, isolamento e identificação de microrganismos em laboratório. Eles podem ser classificados de diversas formas: quanto ao estado físico (sólido, semissólido, líquido), quanto à composição (quimicamente definidos ou complexos) e quanto à sua função (enriquecimento, seletivo, diferencial, transporte). Considerando a classificação funcional dos meios de cultura, analise as afirmativas a seguir:

I. O Ágar Sangue é um meio de enriquecimento e diferencial, pois contém sangue, que fornece nutrientes adicionais para o crescimento de microrganismos fastidiosos, e permite a diferenciação de bactérias com base em sua capacidade de produzir hemolisinas (alfa, beta ou gama-hemólise).

II. O Caldo Selenito-Cistina é um meio de enriquecimento seletivo, utilizado para o isolamento de Salmonella spp. a partir de amostras fecais, pois o selenito de sódio inibe o crescimento da microbiota coliforme normal, permitindo a multiplicação preferencial da Salmonella.

III. O Ágar Eosina-Azul de Metileno (EMB) é um meio seletivo para bactérias Gram-negativas e diferencial para fermentadores de lactose; bactérias fermentadoras rápidas de lactose, como Escherichia coli, produzem ácidos que precipitam os corantes, resultando em colônias com um característico brilho verde metálico.

Está correto o que se afirma em:

Técnicas moleculares têm tido uma grande influência no desenvolvimento do diagnóstico de doenças provocadas por vírus, bactérias, fungos e protozoários porque