As técnicas microfluídicas foram desenvolvidas com o objetivo de tornar os modelos de cultivo celular 3D mais fisiológicos. Essas técnicas, aliadas à cultura celular 3D, possibilitaram o cultivo de “órgãos em chips”, sistema que se caracteriza por

Em uma cultura celular, o tamanho dos esferoides varia em função do tipo e do número de células cultivadas que se organizam espontaneamente, depositam matriz extracelular e formam microambientes específicos. A técnica de cultura celular em questão permite o cocultivo de diferentes tipos celulares. Em função da difusão da periferia para o centro da estrutura tridimensional formada pelas células em cultivo, forma-se um gradiente de nutrientes, gases e metabólitos celulares ao longo de seu raio, conforme apresentado na figura a seguir.

Suponha que a estrutura celular tridimensional seja formada por células tumorais e tenha atingido um diâmetro maior do que 500 μm. Nesse caso, os números 1 a 5 podem ser, correta e respectivamente, substituídos por:

A cultura de linhagens celulares por meio da técnica da gota pendente, em superfícies não aderentes ou utilizando o método de levitação magnética (MLM – magnetic levitation method), no qual as células são cultivadas com nanopartículas e mantidas em cultura com campo magnético, resulta em culturas celulares

As células são cultivadas sobre membrana porosa de inserto e expostas à interface líquido-ar. A superfície da membrana pode ser coberta por matriz extracelular e, ainda, este modelo permite cocultura com outras células, que, imersas na matriz extracelular, mimetizam o estroma subjacente. Queratinócitos derivados da epiderme, quando cultivados em meio líquido, formam uma monocamadas mas, ao serem expostos a uma interface líquido-ar, estratificam e diferenciam-se.

(Marianna Cavalheiro et al. Modelos tridimensionais de cultura de células. Adaptado)

O texto descreve um cultivo celular tridimensional utilizando linhagens de células

Com vistas a reproduzir o arranjo que as células apresentam nos tecidos humanos em ambiente in vivo, foram criados os modelos de cultura celular tridimensionais (3D). Nesses modelos, as células podem se desenvolver e interagir com o ambiente em todas as três dimensões. Um desses modelos é o cultivo de células humanas em moldes que procuram criar um ambiente que mimetiza a matriz extracelular. Para isso, os moldes utilizados podem ser biopolímeros, como

No laboratório de cultura de células, materiais como vidrarias em geral, tubos e ponteiras devem ser estéreis. O processo comumente utilizado é a autoclavação, no qual a esterilização é feita por vapor saturado sob pressão de 1 atmosfera e temperatura de 121 ºC. Para realizar o processo de autoclavação, devem ser realizados os seguintes procedimentos:

As linhagens celulares podem ser constituídas por células transformadas, ou seja, que apresentam modificações que as tornam genética e morfologicamente diferentes do tecido original. A transformação da célula pode ocorrer por diferentes fatores, podendo ser induzida por vírus, substâncias químicas ou agentes físicos. Um exemplo desse tipo de linhagem celular constituída por células transformadas é a linhagem

Dada a extensa aplicação das culturas de células somáticas de mamíferos em diversos tipos de ensaios biológicos, pesquisadores de todo o mundo isolaram e estabeleceram várias linhagens celulares, como apresentado no quadro a seguir.

As informações, numeradas de 1 a 5 no quadro apresentado, podem ser substituídas corretamente por:

Como em qualquer atividade laboratorial, o trabalho com culturas celulares pode envolver uma série de riscos aos profissionais. Assim, há necessidade de se planejar todos os procedimentos, de modo a executá-los observando as normas de biossegurança. A manipulação de células e tecidos humanos pode envolver riscos aos trabalhadores, como o contato com

Em uma cultura, as células de uma população normalmente apresentam-se em diferentes fases de ciclo celular. O estudo do ciclo celular de linhagens cultivadas in vitro tem se mostrado muito eficiente em testes de tratamento de células tumorais e em avaliações toxicológicas de substâncias e fármacos. Para facilitar esses estudos, o uso de uma metodologia de sincronização celular permite que sejam analisados os efeitos dos fármacos em fases específicas do ciclo celular. Uma variedade de técnicas e substâncias podem sincronizar células em fases específicas do ciclo celular, representado a seguir.

Na sincronização de uma cultura celular, quando se utiliza o nocodazol, um inibidor da formação de microtúbulos, as células são mantidas na fase indicada pelo número