Analise as afirmativas abaixo sobre os fenômenos de photobleaching/quenching relacionados ao uso de fluoróforos em microscopia de fluorescência.

I. O quenching é reversível e está associado a interações não covalentes do fluoróforo com características do meio externo, como pH ou concentração de íons.

Il. O photobleaching é um processo irreversível, associado à extinção do fluoróforo com participação de luz incidente, oxigênio molecular e/ou calor.

III. O uso de um obturador na fonte de luz é útil para eliminar o quenching, embora não seja efetivo sobre o fenômeno de photobleaching.

IV. O quenching, ao contrário do photobleaching, é independente da concentração do fluoróforo no meio, geralmente muito alta em amostras muito espessas ou muito concentradas.

A alternativa que contém as opções corretas é:

Os fixadores empregados em microscopia de luz podem ser soluções simples ou complexas formadas pela adição de dois ou mais agentes fixadores. Eles apresentam diferentes propriedades químicas que podem se adequar às características das amostras e objetivos do pesquisador. Assinale a opção que correlaciona corretamente o tipo de fixador à sua característica:

O microscópio de contraste interferencial e o microscópio de contraste de fase permitem a observação de objetos defasantes, que modificam a fase da onda incidente sobre eles, sem modificar a sua amplitude. Esses objetos seriam invisíveis em microscopia de campo claro comum. Com relação ao funcionamento do microscópio interferencial de Normaski, é correto afirmar que:

O uso de pinholes em microscopia confocal acarreta a obtenção de uma quantidade mínima de luz a partir de uma dada amostra, fazendo-se necessário o uso de detectores altamente sensíveis aos fótons para a coleta de imagens sem perda de informações biologicamente relevantes.

Analise as afirmativas abaixo sobre o uso desses detectores:

I. O detector de pseudo-cores apresenta a ferramenta de compensação offset, a qual aproxima o nível de cinza do plano de fundo ou background da imagem o máximo possível do zero para a obtenção de imagens com o fundo escuro adequado.

Il. O detector do tipo fotomultiplicador (PMT) capta a intensidade de luz, convertendo fótons em elétrons que são interpretados por um sistema operacional.

III. O detector de pseudo-cores apresenta a ferramenta de ganho, a qual amplifica o sinal de entrada gerando valores decrescentes de cinza, melhorando o brilho da imagem.

IV. O detector do tipo câmera dispositivo de carga acoplada ou CCD é adequado para obtenção de imagens em alta velocidade nos microscópios confocais convencionais, embora haja algum nível de perda de informação da imagem.

A opção que contém as afirmativas corretas é:

A obtenção de imagens tridimensionais em microscopia confocal é feita pela captura de planos subsequentes do espécime. E parâmetro determinante de ajuste do microscópio para a obtenção dessas imagens:

A microscopia confocal em células vivas tem se tornado importante instrumento para a pesquisa científica. O uso dos “Spinning Confocal Microscopes” é indicado para esse tipo de microscopia por proporcionar:

O laser do microscópio confocal é capaz de excitar os espécimes em comprimentos de onda bem precisos. Para se obter imagens de marcações múltiplas de boa qualidade, no entanto, é necessário também que os fluoróforos usados possuam:

Se um usuário observa seu material com o filtro apropriado para o fluoróforo Rodamina, o laser indicado para excitar esse material é o:

Para a comparação entre grupos experimentais usamos os testes estatísticos. Os desenhos experimentais e algumas medidas descritivas determinam a escolha correta do teste. Suponha que um pesquisador deseje analisar um experimento representado por medidas de área ocupada por marcações em campos histológicos, com dois grupos experimentais. As medidas descritivas de seus dados indicam que suas amostras são pequenas.

Nesse caso, o teste estatístico recomendável é o:

Os agentes biológicos constituem ameaças que devem ser cotidianamente eliminadas através de diversos agentes químicos e físicos.

O procedimento que descreve a inativação eficiente e correta de agentes biológicos é: