Analise as afirmativas abaixo sobre os fenômenos de photobleaching/quenching relacionados ao uso de fluoróforos em microscopia de fluorescência.

I. O quenching é reversível e está associado a interações não covalentes do fluoróforo com características do meio externo, como pH ou concentração de íons.

Il. O photobleaching é um processo irreversível, associado à extinção do fluoróforo com participação de luz incidente, oxigênio molecular e/ou calor.

III. O uso de um obturador na fonte de luz é útil para eliminar o quenching, embora não seja efetivo sobre o fenômeno de photobleaching.

IV. O quenching, ao contrário do photobleaching, é independente da concentração do fluoróforo no meio, geralmente muito alta em amostras muito espessas ou muito concentradas.

A alternativa que contém as opções corretas é: