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No início de uma seção do microscópio confocal, uma preocupação do operador é a detecção do sinal fluorescente. Uma ferramenta importante para a obtenção de imagens de qualidade é o range indicator. Ele redistribui o histograma de intensidade e a frequência de pixels entre os menos intensos e os mais intensos e aponta na tela regiões de exclusão de alta e baixa intensidade. Uma imagem de boa qualidade teria a seguinte representação:
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O uso de anti-fading na montagem de lâminas para microscopia confocal tem como objetivo evitar:
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Um requisito básico para a boa fixação de material biológico é a manutenção do pH da solução fixadora. Para isso, podem ser utilizados diferentes tipos de tampão. O tampão vantajoso para estudos citoquímicos pela ausência de íons fosfato é o seguinte:
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Assinale a opção que apresenta o tipo de microscopia em que foram obtidas as imagens abaixo.
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A análise de colocalização em microscopia confocal permite afirmar se determinadas proteínas ocorrem em regiões semelhantes na célula. Para esse tipo de análise, é um dos fatores determinantes de precisão:
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Para observação no microscópio eletrônico de varredura, um dos requisitos básicos é que a amostra apresente a seguinte característica:
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Na microscopia eletrônica de transmissão, é preciso incluir a amostra em uma resina que lhe dê consistência para passar pela etapa de ultramicrotomia. A resina mais indicada na técnica imunocitoquímica ultraestrutural pré-inclusão é:
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Um determinado fluoróforo usado na imunomarcação de proteínas de um tecido é excitado em azul e observado em verde. Os valores de comprimento de onda para excitação e emissão são, em nm, respectivamente:
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O fixador que apresenta muita eficiência em preservar as macromoléculas da célula por realizar ligações cruzadas entre as proteínas celulares, possuir baixa taxa de penetração no material biológico e aumentar a permeabilidade do tecido à resina no processo de inclusão, é o:
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Para observar materiais biológicos no microscópio eletrônico de varredura de alto vácuo, eles devem passar por várias etapas de processamento. A etapa em que ocorre a conversão do estado líquido para o estado gasoso do CO2, por meio do aumento de temperatura e pressão, anulando a tensão superficial sobre o material, é:
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