Os principais locais de colheita são: veia jugular esquerda, geralmente mais proeminente que a direita. A veia ulnar superficial ou veia braquial. A veia metatársica medial é uma boa opção para colheita, pois a formação de hematoma é rara. Apesar de não ser facilmente visualizada, é um vaso facilmente acessível em aves que pesam menos de 100 g. É bastante utilizada para Anseriformes, Psitaciformes e aves de rapina.

De uma ave que pese 30 g pode ser retirado com segurança 0,3 ml de sangue (1% do peso corporal), estimando-se que 3 ml correspondam a 10% do volume sanguíneo total. Aves do porte de perus e galinhas são mais tolerantes à perda sanguínea do que mamíferos, devido à maior capacidade de mobilização de fluido extravascular e, em algumas espécies, por causa dos reflexos de barorreceptores.

Para o hemograma, são necessárias amostras de sangue em tubos contendo heparina como primeira escolha de anticoagulante, mas o ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) também pode ser utilizado para análises hematológicas, sendo que, em muitas espécies de aves, ocorre hemólise quando armazenado em tubos com EDTA. É recomendado que os esfregaços sanguíneos sejam feitos no momento da colheita.

A maioria das provas bioquímicas é realizada com plasma ou soro. Para obtenção do soro, deve- se colher a amostra em tubos sem anticoagulante, com ou sem ativador de coágulo, e centrifugá-la. No entanto, como o sangue de algumas espécies de aves frequentemente resulta em amostra pequena de soro, prefere-se o plasma com EDTA para avaliações bioquímicas de rotina.