A coloração é uma das técnicas mais importantes na identificação de bactérias, tendo por finalidade facilitar a observação microscópica das bactérias e diferenciálas de acordo com suas características tintoriais. Na prática, os corantes são divididos em dois grupos: ácidos e básicos. (...) A coloração de Azul de Metileno Alcalino de Loeffler tem o preparo de reagentes: Solução A: 0,3 g de azul de metileno em 30 mL de álcool etílico a 95%. Solução B: hidróxido de potássio a 0,01%. Mistura-se a Solução A com 100 mL da Solução B.

Sobre o “Método de Coloração de Azul de Metileno Alcalino de Loeffer”, temos:

I – Fixar as lâminas com calor brando.

II – Cobrir as lâminas com corante, durante 1 a 2 minutos.

III – Lavar rapidamente e enxugar em papel de filtro.

IV – Aquecer durante 15 minutos.

Marque a alternativa com a série correta.