A metodologia desenvolvida por Frederick Sanger em 1977 tornou possível o sequenciamento de moléculas de DNA. Atualmente, esta metodologia é mundialmente difundida, sendo utilizada, inclusive, como base para o desenvolvimento de algumas metodologias de sequenciamento de nova geração. O método de Sanger se baseia na utilização de didesoxirribonucleotídeos trifosfato (ddNTPs), que, ao serem inseridos nas cadeias nascentes de DNA:
