O espectofotômetro é utilizado para medidas de absorção apenas de luz visível nas pesquisas bioquímicas.

Todo o espectofotômetro possui uma fonte de luz, que é em geral uma lâmpada de tungstênio ou de deutério para luz visível e ultravioleta respectivamente.

O feixe de luz é dirigido ao monocromador, o qual pode ser ajustado pelo operador para um comprimento de onda desejado.

A luz transmitida pela amostra e que atinge o fotomultiplicador é transformada num impulso elétrico que é amplificado, escalonado e depois oferecido ao operador através de um visor ou impressora.