São bactérias Gram-Negativas que crescem na presença ou ausência de oxigênio.

As células têm forma espiralada e sua motilidade é conferida por flagelos.

Por observação direta ao microscópio, podem parecer no formato de cachos de uva.

A sua atividade hemolítica em ágar sangue é uma característica que, juntamente com outras características bioquímicas, permite distinguir a L. monocytogenes das outras espécies pertencentes ao gênero Listeria.

A L. monocytogenes consegue crescer em ambientes com temperaturas entre 35 e 60°C e pode sobreviver em temperaturas acima de 60°C por até 12 horas.