quanto mais citosina e timina houver na composição dos oligonucleotídeos maior será a temperatura ideal de anelamento.

o íon magnésio não é necessário para ação da DNA polimerase.

a confirmação da identidade do fragmento de PCR pode ser feito através do método de Northern-blot.

a temperatura de anelamento não depende do tamanho do oligonucleotídeo e de sua sequência de nucleotídeos.

o oligonucleotídeo pode se ligar a outras posições na fi ta molde quando a temperatura de anelamento for muito baixa.