Os ensaios ELISA são realizados em placas de poliestireno, tipicamente em placas de 96 poços revestidas para ligação forte de proteínas. Dependendo do tipo de ELISA, o teste requer um anticorpo de detecção primário e/ou secundário, analito/antígeno, anticorpo/antígeno de revestimento, tampão de lavagem e substrato/cromógeno. O anticorpo de detecção primário é um anticorpo específico que se liga apenas à proteína de interesse. Já o anticorpo de detecção secundário é um segundo anticorpo conjugado com enzima que se liga a um anticorpo primário não conjugado com enzima.
Nesse contexto, existem quatro etapas principais para a realização de um ensaio imunológico. É correto afirmar que NÃO faz parte de imunoensaios: