Os microorganismos que devem ser manipulados em Laboratório NB3 incluem:

I. Vírus da Febre Amarela selvagem, Bacillus anthracis e Chlamydia psittaci.

II. Helicobacter pylori, Vírus da Hepatite C e Chlamydia pneumoniae.

III. Vírus Marburg, Mycobacterium leprae e Vírus Rocio.

Assinale:

Os critérios de risco primário usados para a definição dos níveis de contenção em laboratórios biológicos (referidos como níveis de segurança biológica) são:

Com relação aos procedimentos de biossegurança, analise as afirmativas a seguir.

I. As capelas de exaustão devem ser utilizadas sempre que os experimentos envolvam reagentes com potencial de explosão ou que produzam gases tóxicos e nocivos. Para garantir o funcionamento correto das capelas de exaustão, solte dentro da capela uma folha de papel absorvente ou qualquer papel fino o bastante e observe se esta folha é empurrada pelo fluxo de ar em direção à superfície do capela.

II. Nunca se aproxime de fontes de laser sem utilizar óculos de proteção e nunca deixe materiais reflexivos próximos a estas fontes de laser.

III. Nunca toque a superfície de lâmpadas de mercúrio utilizadas em microscópios ou outros aparelhos sem luvas de proteção, pois além destas lâmpadas se aquecerem após o uso, a manipulação sem luvas pode levar à contaminação e ao dano.

Assinale:

Analise as afirmativas abaixo.

I. Para o preparo de meio de cultivo de células eucarióticas, deve-se inicialmente solubilizar os componentes do meio com 80 a 90% do volume final de água destilada e posteriormente adicionar os componentes como bicarbonato e HEPES.

II. Após a esterilização do meio de cultura, deve-se ajustar o pH do mesmo.

III. O soro de origem animal a ser utilizado no meio de cultivo nunca deve ser sido inativado antes de ser adicionado ao meio.

Assinale:

O subcultivo da maioria das células aderentes envolve a utilização da protease tripsina e do sal EDTA. Sobre o motivo da utilização destes reagentes no procedimento de subcultivo celular, analise as afirmativas a seguir.

I. As células aderem à superfície inferior da garrafa de cultivo e umas as outras pelas proteínas que compõe a matriz extracelular. Enquanto a tripsina reconhece e cliva regiões nativas destas proteínas, a função do EDTA é quelar os íons Ca²⁺, que são requeridos para a ligação célula-célula mediada pelas caderinas. Desta forma, tanto o EDTA quanto a tripsina servirão para promover o destacamento das células do frasco de cultivo e sua separação.

II. As células são cultivadas geralmente na presença de soro que fornece fatores de crescimento necessários para a divisão celular. A fim de realizar o subcultivo é necessário eliminar o soro presente no meio. A tripsina irá clivar as proteínas do soro e o EDTA facilitará a formação de agregados protéicos que serão facilmente removidos ao se descartar este meio, promovendo assim a retirada do soro do meio de cultivo.

III. As células aderem à superfície inferior da garrafa de cultivo e umas as outras através das proteínas que compõe a matriz extracelular. A tripsina reconhece e cliva regiões nativas destas proteínas e a função do EDTA é servir de co-fator para a tripsina aumentando sua atividade. Desta forma, promovendo o destacamento das células do frasco de cultivo e sua separação.

Assinale:

Assinale a alternativa correta.

Sobre a obtenção de culturas primárias de linfócitos e macrófagos a partir do sangue periférico, analise as afirmativas a seguir.

I. O sangue periférico deve ser coletado na presença de um anti-coagulante.

II. O sangue periférico deve ser misturado com volumes iguais de solução salina ou PBS e adicionado cuidadosamente no topo de algum tipo de composto que agrega eritrócitos (polímeros de polissacarídeos) e aumenta a taxa de sedimentação destas células. Assim sendo, os eritrócitos serão sedimentados após centrifugação enquanto os leucócitos poderão ser coletados a partir do sobrenadante.

III. Após a obtenção dos leucócitos, estes devem ser inoculados em placas de plástico contendo meio nutritivo rico por um período de 30 minutos a duas horas a uma temperatura de 37°C. Após este período, os monócitos estarão aderidos ao suporte plástico e os linfócitos estarão soltos no sobrenadante, estes últimos são transferidos para outro frasco de cultivo, enquanto os monócitos serão cultivados por no mínimo sete dias para sua diferenciação em macrófagos.

Assinale:

Sobre as classificações de resíduos químicos e as normas de descarte associadas, assinale a afirmativa incorreta.

Sobre o procedimento de cultivo das linhagens celulares que crescem em suspensão, assinale a alternativa incorreta.

Sobre as cabines de segurança biológica (CSB), assinale a alternativa incorreta.