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O processo de transformação constitui um evento de alta importância na técnica de manipulação gênica. A transformação natural descrita por Griffith, em 1928, e por Avery e colaboradores, em 1944, é um evento raro. No entanto, em 1970, Mandel e Higa encontraram que E. coli tornou-se marcadamente competente para transformação com DNA exógeno, quando a bactéria foi suspensa em cloreto de cálcio gelado e submetida a um curto choque térmico a 42 ºC. Com base neste texto, analise as afirmativas a seguir.
I. Estes mesmos autores também verificaram que as bactérias crescidas até a fase log eram mais competentes do que aquelas isoladas de outros estágios do crescimento. II. Para uma boa eficiência de transformação, o procedimento do cloreto de cálcio, usado até hoje, produz uma eficiência que varia de 101 a 103 transformantes por micrograma de DNA intacto. III. O tamanho e a conformação da molécula do DNA afetam o processo de transformação e o DNA linear é mais facilmente incorporado pela célula bacteriana competente.
Assinale:
I. Estes mesmos autores também verificaram que as bactérias crescidas até a fase log eram mais competentes do que aquelas isoladas de outros estágios do crescimento. II. Para uma boa eficiência de transformação, o procedimento do cloreto de cálcio, usado até hoje, produz uma eficiência que varia de 101 a 103 transformantes por micrograma de DNA intacto. III. O tamanho e a conformação da molécula do DNA afetam o processo de transformação e o DNA linear é mais facilmente incorporado pela célula bacteriana competente.
Assinale:
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A Metodologia Científica é o conjunto de etapas ordenadamente dispostas a serem executadas na investigação de um fenômeno. A Metodologia Científica é constituída pelas etapas de formulação do problema, formulação de hipóteses, coleta dos dados, análise dos dados, conclusões e generalizações. Sobre a elaboração de hipóteses, assinale a afirmativa incorreta.
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Analise as afirmativas a seguir.
I. A técnica de DNA recombinante permite localizar, isolar, preparar e estudar pequenos segmentos de DNA, e seus produtos protéicos, derivados de cromossomos muito maiores. II. O primeiro organismo usado para a expressão heteróloga de proteínas usando a tecnologia do DNA recombinante foi o plasmódium Escherichia coli. III. Os plasmídeos são moléculas de DNA circular extra cromossomal que podem ser propagados prontamente por um organismo heterólogo permitindo a síntese de uma proteína pela inserção de genes de interesse numa nova combinação de DNA cromossomal ou extra cromossomal de acordo com o vetor de clonagem.
Assinale:
I. A técnica de DNA recombinante permite localizar, isolar, preparar e estudar pequenos segmentos de DNA, e seus produtos protéicos, derivados de cromossomos muito maiores. II. O primeiro organismo usado para a expressão heteróloga de proteínas usando a tecnologia do DNA recombinante foi o plasmódium Escherichia coli. III. Os plasmídeos são moléculas de DNA circular extra cromossomal que podem ser propagados prontamente por um organismo heterólogo permitindo a síntese de uma proteína pela inserção de genes de interesse numa nova combinação de DNA cromossomal ou extra cromossomal de acordo com o vetor de clonagem.
Assinale:
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Dentre as características dos protozoários sarcodíneos não está:
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A leptospirose é uma zoonose mundialmente distribuída e que afeta animais silvestres, domésticos bem como o ser humano. Sendo causadora de uma das zoonoses mais dispersas no mundo (Who, 2003), Leptospira spp. tem um vasto repertório de adesinas e lipoproteínas, as quais vêm sendo testadas para o desenvolvimento de uma vacina mais eficiente contra a doença. A suspeita clínica de contaminação por leptospira deve ser confirmada por métodos laboratoriais específicos. Na fase imune da doença (a partir do quinto dia a contar do início dos sintomas), os métodos sorológicos são os mais adequados. Devem ser utilizados os testes de Elisa-IgM. Com base na imagem abaixo, escolha a alternativa que apresenta as etapas corretas e ordenadas para a realização do ensaio de ELISA na determinação do diagnóstico.
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Os vetores de clonagem são carreadores de moléculas de DNA. Sobre as características mais comuns nesses vetores, analise as afirmativas a seguir.
I. Ser capaz de se auto-replicar, amplificando o segmento que eles carregam, de forma independente. II. Carregar genes marcadores de seleção, permitindo a identificação das células que contenham o vetor de expressão (por exemplo, genes que conferem resistência à antibióticos). III. Conter sequências únicas de reconhecimento por diferentes endonucleases de restrição presentes mais de uma vez no plasmídeo para permitir a inserção do cDNA de interesse.
Assinale:
I. Ser capaz de se auto-replicar, amplificando o segmento que eles carregam, de forma independente. II. Carregar genes marcadores de seleção, permitindo a identificação das células que contenham o vetor de expressão (por exemplo, genes que conferem resistência à antibióticos). III. Conter sequências únicas de reconhecimento por diferentes endonucleases de restrição presentes mais de uma vez no plasmídeo para permitir a inserção do cDNA de interesse.
Assinale:
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A clonagem de um gene é somente o primeiro passo na tecnologia de DNA recombinante. A produção em ampla escala de uma proteína recombinante é o objetivo principal dos pesquisadores que utilizam essa técnica. Muitos organismos podem ser usados para expressão de proteínas em sistemas heterólogos. Nos sistemas de expressão disponíveis é correto afirmar que podemos expressar proteínas em:
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Analise as afirmativas a seguir.
I. A eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. II. A eletroforese em gel é utilizada para separar proteínas e moléculas de DNA e RNA. III. Existem vários tipos de eletroforese em gel para analisar proteínas durante o processo de purificação. Entre elas, estão a eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil de sódio sulfatado (SDS-PAGE), a eletroforese em gel de poliacrilamida não desnaturante (Native PAGE) e o gel em duas dimensões.
Assinale:
I. A eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. II. A eletroforese em gel é utilizada para separar proteínas e moléculas de DNA e RNA. III. Existem vários tipos de eletroforese em gel para analisar proteínas durante o processo de purificação. Entre elas, estão a eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil de sódio sulfatado (SDS-PAGE), a eletroforese em gel de poliacrilamida não desnaturante (Native PAGE) e o gel em duas dimensões.
Assinale:
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Analise as afirmativas a seguir.
I. Os vetores para expressão em mamíferos contém sequências que facilitam a propagação em bactéria, bem como sequências específicas para permitir a expressão em células eucarióticas. II. O vetor para expressão em células de mamíferos não precisa de uma origem de replicação para células eucarióticas. III. O sistema de expressão em células de mamíferos podem ser divididos em dois tipos conhecidos como transiente e estável, que envolve a integração do gene no DNA cromossômico.
Assinale:
I. Os vetores para expressão em mamíferos contém sequências que facilitam a propagação em bactéria, bem como sequências específicas para permitir a expressão em células eucarióticas. II. O vetor para expressão em células de mamíferos não precisa de uma origem de replicação para células eucarióticas. III. O sistema de expressão em células de mamíferos podem ser divididos em dois tipos conhecidos como transiente e estável, que envolve a integração do gene no DNA cromossômico.
Assinale:
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A estrutura composta de polissacarídeos e glicoproteínas que envolve a parede celular de algumas bactérias é chamada de:
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