Em um ensaio de RIA/ELISA competitivo, podemos afirmar que:
I. Pelo uso de quantidades conhecidas de um antígeno padrão marcado, pode-se gerar uma curva padrão, relacionando a radioatividade da enzima ligada versus a quantidade do antígeno. A partir desta curva padrão, a quantidade de um antígeno pode ser determinada em uma amostra desconhecida, pois o antígeno marcado e o não marcado estarão competindo pela ligação ao anticorpo utilizado no ensaio. II. A separação dos complexos imune do restante dos componentes presentes na amostra pode ser obtida pela técnica de Far, que irá precipitar imunoglobulinas mas não muitos antígenos. III. O anticorpo pode ser imobilizado na superfície de uma pérola de plástico ou cobrindo a superfície de uma placa de plástico e, assim, os complexos imune podem facilmente ser separados dos outros componentes presentes na amostra pela simples lavagem das pérolas ou da placa (competitivo de fase sólida).
Assinale:

A dengue atualmente é a mais importante doença viral transmitida por mosquitos nos países tropicais e subtropicais atingindo pelo menos 100 milhões de indivíduos a cada ano. A doença é causada um dos quatro sorotipos do vírus da dengue (DENV-1, 2, 3, 4). Ainda não existe disponível uma vacina ou drogas antivirais específicas para o controle da infecção por DEN. O diagnóstico desta doença se baseia na detecção de anticorpos presentes no soro de indivíduos infectados. Em laboratório, podem ser produzidos antígenos recombinantes em bactérias. Imagine que dois antígenos recombinantes tenham sido produzidos: o antígeno X correspondendo à porção amino-terminal do envelope do vírus e o antígeno Y correspondente a um pedaço de NS5, purificados por cromatografia e utilizados em ensaios de ELISA. Abaixo estão descritos os resultados de reatividade cruzada obtidos quando estes antígenos foram incubados com soro de pacientes sabidamente diagnosticados para vírus DENV 1, DENV 2 e DENV 3.


Baseados nestes resultados podemos afirmar que:

Se você, hipoteticamente, quisesse construir um plasmídio contendo um gene para a produção em larga escala de uma proteína do vírus da dengue em bactérias você teria que adicionar uma seqüência que permita a ligação de ribossomos no mRNA transcrito permitindo assim que este gene seja traduzido no sistema heterólogo da bactéria. Esta seqüência é denominada sequência:

A técnica de Chromossome walking é utilizada com a finalidade de:

O seqüenciamento de um genoma eucarioto é um projeto de grande porte, que exige a realização de várias etapas experimentais. Para a a otimização deste tipo de projeto uma etapa fundamental é a:

A definição de nested-PCR ou PCR “aninhado" é:

Sobre pirosequenciamento, assinale a afirmativa incorreta.

A clonagem pelo método de shotgun se diferencia da metodologia convencional de clonagem pois:

Abaixo está representado um vetor plasmidial vendido por empresas de biotecnologia. Como pode ser observado, o vetor apresenta diversas características que o tornam útil em aplicações biotecnológicas .


1. Tamanho 5,5Kb. 2. Promotor CMV (citomegalovírus) localizado antes do MCS (sítio de clonagem múltiplo). 3. Possui sequências T7 e BGH flanqueando o MCS permitindo o seqüenciamento desta região com iniciadores apropriados. 4. Sítio de poliadenilação de BGH ao final do MCS permitindo a produção de um mRNA poliadenilado. 5. Caudas MYC e HIS após o sítio de clonagem. 6. Possui gene para resistência a Ampicilina. 7. Possui gene para resistência a Neomicina controlado pelo promotor viral de SV40 e sítio de poliadenilação. 8. Possui origem de replicação bacteriana F1.
Considerando as características do vetor acima, assinale a afirmativa correta.

O seqüênciamento de DNA pode ser otimizado pela introdução de 7-deaza-citidina. Esta adaptação é utilizada quando a seqüência a ser determinada: