A atividade transcricional de um promotor específico em células de mamífero foi investigada. Para tanto, clonou- se um gene repórter em um vetor de expressão e realizou-se a transfecção nas células. Observou-se que a expressão do gene repórter foi muito baixa. Sabendo que elementos amplificadores são conhecidos por aumentar significativamente a transcrição de genes ao interagirem com promotores e melhorarem a eficiência da transcrição, qual procedimento resolve esse problema?

Uma proteína recombinante em células de mamífero está sendo construída utilizando-se um vetor de expressão. Foram escolhidos um promotor forte e um sinal de poliadenilação adequado. No entanto, após a transfecção, o pesquisador observa que a proteína recombinante não está sendo expressa. Assinale a alternativa que corretamente explica o motivo dessa falha na expressão.

Ao realizar um experimento de clonagem gênica, um(a) pesquisador(a) percebe que a taxa de transformação das bactérias com o plasmídeo recombinante é muito baixa, então decide modificar alguns parâmetros para melhorar a eficiência. Para atingir essa eficiência, o(a) pesquisador(a)

Durante a clonagem de um gene humano em um vetor bacteriano, são obtidas colônias transformadas, mas o gene de interesse não é expresso; e verifica-se que a sequência do gene está intacta no plasmídeo. A causa mais provável para a falta de expressão do gene é:

Um(a) estagiário(a) em biologia molecular está tentando clonar um gene de interesse em um vetor de expressão. Após várias tentativas, não consegue obter colônias positivas com o gene clonado, então decide sequenciar o vetor após a digestão com as enzimas de restrição. A análise revela que os sítios de restrição do vetor não foram cortados. Assinale a alternativa que apresenta corretamente a explicação da causa mais provável desse problema.

Em um experimento de clonagem, um(a) cientista utiliza um vetor contendo um gene de resistência a antibiótico e um sítio de clonagem múltiplo (MCS). Após transformar as bactérias com o vetor recombinante, o cientista plaqueia as células em um meio contendo o antibiótico apropriado. Muitas colônias crescem, mas poucas contêm o inserto desejado. Assinale a alternativa que apresenta a possível causa para a baixa taxa de obtenção de colônias com o inserto.

Um(a) pesquisador(a) está realizando um experimento de clonagem de um gene específico em um plasmídeo vetor. Após a digestão do DNA genômico e do vetor com as mesmas enzimas de restrição, o(a) pesquisador(a) realiza a reação de ligação e transforma células competentes com o produto. No entanto, após a cultura, não são encontradas colônias contendo o inserto desejado. Considerando que o objetivo é identificar a causa mais provável para a ausência de colônias com o inserto, qual das seguintes situações pode ser a causa principal?

Um grupo de cientistas está utilizando um sistema de repórter gênico para avaliar a expressão de um promotor específico em células de mamíferos. Após a transfecção das células com o plasmídeo repórter, eles observam baixa atividade luminescente. O fator que mais provavelmente contribui para essa baixa atividade é:

A expressão gênica entre diferentes tecidos de um organismo foi comparada, utilizando RNA-Seq para essa tarefa. Foi observada uma grande quantidade de dados de expressão diferencial. A etapa mais corretamente crucial para garantir a qualidade dos dados de RNA-Seq é:

Uma empresa de biotecnologia está desenvolvendo um novo kit de qRT-PCR para quantificação da expressão de genes em plantas e quer assegurar que o kit funcione com eficiência em várias espécies vegetais. Foi observado que a eficiência do kit varia entre espécies. Qual das seguintes abordagens é a mais apropriada para resolver especificamente esse problema?