Com relação às faixas de tolerância e os níveis requeridos para manter as atividades biológicas, pode-se deduzir que, à medida que o organismo é exposto a algum estresse ambiental, seja uma condição extrema ou um agente tóxico, que o leva para fora de sua faixa ótima, algum processo biológico é comprometido. Por outro lado, condições climáticas (como a temperatura) não influenciam na sensibilidade dos organismos a determinados agentes.

Quanto mais larga a faixa de tolerância a condições ambientais, maior o nível requerido pelo organismo para sobreviver, crescer e reproduzir-se. Portanto, testes que abranjam estes principais processos biológicos, realizados em condições diferenciadas de exposição são importantes na determinação dos efeitos de poluentes e contaminantes ambientais.

Dentre os ensaios eco toxicológicos, a Avaliação e Identificação da Toxicidade, AIT (Toxicity Identification Evaluation - TIE), associa técnicas de fracionamento de amostras e testes de toxicidade (Fase I), análises químicas (Fase II) e confirmação da toxicidade (Fase III), fornecendo uma ideia mais precisa de que tipo de composto (metais, ânions inorgânicos, compostos orgânicos polares e não polares, voláteis, oxidantes, etc.) está envolvido na toxicidade para a biota aquática.

Os testes eco toxicológicos apresentam uma série de normas e procedimentos padronizados que devem ser seguidos para que as respostas sejam consideradas válidas. As séries de diluição são utilizadas para se medir em que concentração o material a ser testado apresenta efeitos ou não sobre aquela determinada população. O controle positivo é uma população exatamente igual à que se encontra em testes, mas sem a adição do contaminante. No controle negativo, utiliza-se um agente tóxico de efeito conhecido para assegurar que o organismo responde apropriadamente.