Leia o texto e observe o esquema a seguir.
Através da PCR, uma sequência de DNA pode ser amplificada milhões ou bilhões de vezes, produzindo cópias suficientes de DNA para serem analisadas por outras técnicas, tais como por sequenciamento, ou digerido por enzimas de restrição e clonado em um plasmídeo. Existem recomendações específicas para a construção de primers, tais como:
1- estabelecer o tamanho entre 18 e 24 bases; 2- assegurar relação entre bases purinas e pirimidinas entre 40 e 60%; 3- procurar sequência do primer com maior concentração de bases G/C na extremidade 5’ e menor concentração (um C ou um G) na porção 3’; 4- evitar trincas de bases repetidas; 5- evitar complementariedade inter e intramolecular, principalmente na extremidade 3’; 6- construir um arranjo de bases que permita uma temperatura de anelamento entre 52 °C e 65 °C, sendo crucial que as temperaturas de fusão dos dois primers sejam próximas.
Fontes: https://ppgca.evz.ufg.br/up/67/o/Dissertacao2005_Paula_Fernandes.pdf;
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/polymerase-chain-reaction-pcr (Adaptado)
Assinale a alternativa que indica a CORRETA associação das recomendações específicas para a construção dos primers (em números arábicos no texto -1 a 6) com seus respectivos motivos.
