Observe as informações sobre um kit ELISA comercial para dosar IL-6 (Human IL-6 Quantikine HS ELISA Kit, marca R&D Systems).

RECOVERY

The recovery of human IL-6 spiked to levels throughout the range of the assay in various matrices was evaluated.

SENSITIVITY

Twenty-five assays were evaluated and the minimum detectable dose (MDD) of human IL-6 ranged from 0.007-0.090 pg/mL. The mean MDD was 0.031 pg/mL.

The MDD was determined by adding two standard deviations to the mean O.D. value of twenty zero standard replicates and calculating the corresponding concentration.

LINEARITY

To assess the linearity of the assay, sample spiked with high concentrations of human IL-6 were serially diluted with the calibrator diluent to produce samples with values within the dynamic range of the assay.

Usando as informações fornecidas na página anterior e os conhecimentos sobre a técnica de ELISA, assinale com V (verdadeiro) ou F (falso) as afirmações abaixo.

( ) O comportamento da curva padrão indica que o kit refere-se a um kit ELISA competitivo.

( ) Com base nos dados de Recovery, este kit pode ser usado para amostras de soro, plasma e urina.

( ) É possível detectar IL-6 em concentração menor que 0,005 pg/mL com o uso de extrapolação matemática da equação da curva padrão.

( ) Este kit é apropriado para analisar uma amostra de soro que contém uma concentração de 15 pg/mL de IL-6.

A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é

A padronização de novos métodos é comum no ambiente de pesquisa, e um rigoroso processo deve ser conduzido antes de validá-los. Neste processo, alguns testes devem ser conduzidos para a determinação de parâmetros.

Considere os seguintes procedimentos independentes:

I - executar o método com variações controladas em alguns parâmetros, como tempo e temperatura de incubação, usando o mesmo conjunto de amostras. Se o resultado medido não depender das variações testadas, ajustar a descrição do método incorporando os intervalos (ex.: 30 \( \pm \) 3 min).

II - fazer 25 alíquotas de amostras com alta e baixa concentração de um determinado alvo molecular. Fazer cinco replicatas de cada amostra, em cinco dias diferentes, e calcular o coeficiente de variação (%CV).

III - congelar alíquotas de uma mesma amostra, numerando- as de zero a cinco. Este número representa a quantidade de descongelamentos e recongelamentos que a alíquota vai sofrer durante os testes. Ao final, analisar todas as alíquotas no mesmo dia, em duplicata. Registrar os resultados e calcular o coeficiente de variação (% CV).

Quais são os parâmetros determinados, respectivamente, pelos testes descritos nos procedimentos acima?

Based on the chromatogram below, generated by HPLC using a reversed-phase column, it is possible toascertain that:

High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) is widely used in research to identify and quantify chemical compounds. Read and assess the following statements about this technique.

I - In a size exclusion chromatography, the size of the peak is related to the size of the molecule.

II - In a reversed-phase HPLC separation, an increase in the amount of organic solvent in the mobile phase will decrease the retention time.

III - If compound A has greater affinity for the column packing than compound B, it will be swept through the column more slowly.

IV - Noise, tailing, and split peaks are examples of parameters that must be given to the hardware before the signal acquisition.

Which statements are correct?

Com relação às aplicações dos analisadores genéticos para eletroforese capilar, assinale com V (verdadeiro) ou F (falso) as afirmações abaixo.

( ) A reação de sequenciamento de Sanger permite obter resultados de cerca de 1.000 pb, dependendo do comprimento do capilar e do polímero utilizado.

( ) Na reação de sequenciamento de Sanger, a proporção de nucleotídeos terminadores de cadeia é a mesma dos nucleotídeos não terminadores de cadeia.

( ) As amostras são injetadas no capilar por gravidade e migram na eletroforese por diferença de potencial elétrico.

( ) A reação de MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification) utiliza um par universal de primers e apenas o primer forward (direto) possui um fluoróforo ligado.

( ) Na reação de sequenciamento de Sanger de uma determinada amostra é essencial colocar um par de primers para obter a sequência das duas fitas do DNA.

A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é

De acordo com a Norma Regulamentadora nº 32 (NR-32), e com a Resolução nº 466/2012, do Conselho Nacional de Saúde, assinale a alternativa INCORRETA.

O uso da microscopia é essencial para responder diversas questões de pesquisa em biologia celular.

Assinale a alternativa correta quanto à utilização e características dessa ferramenta.

Observe a figura abaixo.

Em relação à citometria e ao gráfico de citometria de ciclo celular acima, assinale a alternativa correta.

Observe o gráfico abaixo.

SSC (Side Scatter); FSC (Forward Scatter)

Sobre o gráfico acima, é correto afirmar que:

O cultivo primário de tecidos permite diversas análises moleculares que auxiliam na compreensão de processos celulares complexos.

Sobre esse tipo de cultivo, considere as afirmações abaixo.

I - Células somáticas podem ser isoladas e cultivadas por um período limitado de tempo, de acordo com limite de Hayflick de apoptose replicativa.

II - Se transformadas, através da inserção de um gene que codifica uma subunidade catalítica da telomerase, as células primárias poderão se tornar imortais.

III - Linhagens transformadas para imortalização podem ser usadas indefinidamente sem o risco de desenvolver malignidade.

IV - Células somáticas podem adquirir características de células-tronco através da reprogramação celular.

Quais estão corretas?